体外诊断qPCR引物及探针

作为分子诊断qPCR试剂盒中的核心原料，引物及探针的质量对于样本靶标检测的准确性，qPCR引物及探针起到了极其关键的作用。而对于分子诊断的应用，需要对引物及探针的纯度、荧光强度和洁净度等一系列指标提出更高的要求。自以qPCR技术为基础的分子诊断应用在国内外兴起开始，威尼斯人3940com-威尼斯人81818官方网站生物即不断对生产工艺进行优化升级。目前，威尼斯人3940com生产的引物及探针，已被国内外大量的分子诊断试剂盒生产商采用。

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威尼斯人3940com的优势

1.  专用于生产分子诊断应用产品的10万级洁净生产车间和实验室，其中上海总部获得获得了ISO 13485和GMP认证；
2.   专门经过优化的HPLC_CE (IVD)纯化，在保证纯度的前提下，避免外源性污染；
3.  可选择额外定制QC检测：qPCR 探针荧光检测、NTC检测及关键指标批次间差异检测；
4.  建立周期性质量跟踪体系并定期出具质量跟踪报告。

订购信息

包含一对正反义链，常规情况下不带修饰。IVD专用的 qPCR引物全部在符合医药诊断级的10万级洁净车间生产及纯化，可选择多种纯化方式，推荐专门针对IVD优化的HPLC_CE (IVD)纯化。

备注：

*HPLC_CE (IVD)为推荐纯化方式，如需考虑成本，也可考虑ULTRAPAGE及标准HPLC纯化方式，如对引物纯度要求更高，则可选择2X HPLC纯化方式。选择这些纯化方式的引物均保证在符合医药诊断级的标准的10万级洁净车间内生产；

**如引物长度在碱基范围之外，请在订购前与技术支持进行咨询沟通。

通常为一条双端分别修饰荧光和淬灭基团的单链DNA，其中也包含具有双重淬灭保障的双淬灭荧光探针。IVD专用的 qPCR引物全部在符合医药诊断级的10万级洁净车间生产及纯化，推荐专门针对IVD优化的HPLC_CE (IVD)纯化，可在保证纯度的基础上有效避免外源性污染。

探针修饰方式及基团说明请查看IVD qPCR探针修饰基团说明

备注：

*HPLC_CE (IVD)为推荐纯化方式，如需考虑成本，也可考虑标准HPLC纯化方式，如对引物纯度要求更高，则可选择2X HPLC。选择这些纯化方式的引物均保证按医药诊断级的标准在10万级洁净车间安排生产；

**如引物长度在碱基范围之外，请在订购前与技术支持进行咨询沟通。

质量控制

除标准质检外，针对于IVD qPCR应用的荧光探针，威尼斯人3940com可以通过额外定制QC检测来给予进一步的质量保证。

  荧光值酶切增量（FLU）：确保TaqMan探针、分子信标等常规双标记引物的荧光、淬灭基团功能完全正常。

酶切增量检测案例

对照组由于不含DNase I，双标记探针保持完整，荧光基团被淬灭，只检测到本底荧光值195.1；酶切组中

由于含有DNase I，双标记探针被水解，荧光基团脱离淬灭范围，检测到明显的荧光增强，荧光值达到

11486.9，为本底荧光的58.9倍，符合客户定制的质控标准。

  阳性模板对照检测（PTC）：保证阳性靶标的扩增效率。

PTC扩增检测案例

配置阳性扩增体系，进行qPCR检测，检测扩增曲线、Ct值和荧光值；根据协议，一定浓度模板存在下，qPCR

实验结果应出现合理的Ct值、荧光值以及标准的扩增曲线。不同批次的引物探针应表现出相近的实验结果

  人源污染检测（HSC）：避免引物污染有人gDNA。

HSC扩增检测案例

使用常规人源DNA对应的引物、探针，将待测Oligo作为模板，配制扩增体系，进行qPCR检测，检测扩增曲线

及对应Ct值。A：45个反应循环内扩增曲线呈平线，系统判断无Ct值，则说明引物探针纯净，无人源模板污染；

B：45个循环内，扩增曲线出现翘起，系统判断出Ct值，则说明引物探针有人源基因组DNA污染。

  无模板对照检测（NTC）：杜绝阴性对照出现假阳性。

NTC扩增检测案例

将订单中引物探针配制为qPCR体系，使用水作为模板，进行探针法qPCR反应，通过反应的扩增曲线及系统记录Ct

值，判断引物探针中是否有模板污染。A：若45个循环内，扩增曲线为平线，系统判断无Ct值，则说明引物探针纯

净，无模板污染；B：若45个循环内，扩增曲线出现翘起，系统判断出Ct值，则说明引物探针有模板污染。

资源

文档下载
常规引物合成订购表（68 KB）	引物定制合成手册（1.84 MB）
工业产品手册（7.17 MB）	引物使用说明书（1 MB）
修饰基团说明手册（4 MB）
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